在獲得了無(wú)菌環(huán)境和無(wú)菌材料后，還要保持無(wú)菌狀態(tài)，才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的現(xiàn)象，在微生物學(xué)中叫做污染雜菌。

無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的液清潔，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。 需要帶入無(wú)菌室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法。 工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前，必須用肥皂或液洗手，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。

準(zhǔn)備工作 1． 先進(jìn)行無(wú)菌室空間的，開(kāi)啟紫外燈30—60分鐘 2． 檢驗(yàn)用的有關(guān)器材， 搬入無(wú)菌室前必須分別進(jìn)會(huì) 3． 操作人員必須將手清洗，穿戴好無(wú)菌工作衣、帽和鞋，才能進(jìn)入無(wú)菌室 4． 進(jìn)入無(wú)菌室后再一次手部，然后才進(jìn)行檢驗(yàn)操作

接種針每次使用前后，必須通過(guò)火焰燃燒，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物 。帶有菌液的吸管、試管等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%的來(lái)蘇兒溶液的桶內(nèi)，24h 取出沖洗;培養(yǎng)皿則需在高壓器中重新后方可處理營(yíng)養(yǎng)基，切記不要直接沖入下水道中，防止阻塞。如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用 5%石碳酸溶液或 3%的來(lái)蘇兒傾覆在被污染處至少 30min，再做處理，工作衣帽等受到菌液污染時(shí)，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽后洗滌 。