無(wú)菌室一般為4 — 5 平方米、高 2.5 米的獨(dú)立小房間（與外間隔離），專辟于微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，可以用板材和玻璃建造。無(wú)菌室外要設(shè)一個(gè)緩沖間，錯(cuò)開(kāi)門向，以免氣流帶進(jìn)雜菌。無(wú)菌室和緩沖間都必須密閉、室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過(guò)濾裝置。在獲得了無(wú)菌環(huán)境和無(wú)菌材料后，只有保持無(wú)菌狀態(tài)，才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究。

無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照30分鐘以上，并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室，再用紫外燈輻照30分鐘。

供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開(kāi)啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球外表面。

每次操作過(guò)程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。

吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

接種針每次使用前后，必須通過(guò)火焰灼燒，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。

帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的桶內(nèi)，24小時(shí)后取出沖洗。

凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)后，才能在水下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。

無(wú)菌室前，應(yīng)將所有物品置于操作之部位（待檢物例外），然后打開(kāi)紫外燈30分鐘，時(shí)間一到，關(guān)閉紫外燈待用

進(jìn)入無(wú)菌室前，必須于緩沖間更換過(guò)的工作服、工作帽及工作鞋。

操作應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)定進(jìn)行，操作中少說(shuō)話，不喧嘩，以保持環(huán)境的無(wú)菌狀態(tài)。

吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管，如吸管碰到手及其它未的物體，必須重 新 更 換 ，以 防污染 。

微生物檢驗(yàn)用器材及場(chǎng)所必須進(jìn)行或處理，不同的對(duì)象采用不同的處理方法

1． 高壓蒸汽: 工作服、口罩、稀釋液等，置高壓鍋內(nèi)，一般采用121℃半小時(shí),當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應(yīng)分別處理

2． 火焰：接種針、接種環(huán)等可直接火焰

3． 高溫干燥： 各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃2小時(shí)

4． 一 般: 無(wú)菌室內(nèi)的凳、工作臺(tái)、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無(wú)法進(jìn)行，必須用其他方法進(jìn)行處理，采用2%石炭酸或來(lái)蘇兒水溶液擦拭，工作人員的手也用此法進(jìn)行

5． 空氣的： 開(kāi)啟紫外燈照射30—60分鐘 即可。